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电穿孔法转染如此“万能”，为什么还要用其他方法？

发布时间： 2021-10-09　　点击次数： 2256次

同学们在进行转染时，肯定被各种各样的转染试剂挑花了眼吧。商业化的转染试剂通常针对多重细胞类型、不同的核酸和各种特定的用途，也就是说，你要从种类繁多的试剂中挑选适合你的。

这时候，电穿孔法转染就进入了我们的视野。

电穿孔法转染原理是通过脉冲电场，使得细胞膜上产生小孔，通透性被暂时的提高。周围的小分子穿过小孔，扩散到细胞内。理论上说，电穿孔法转染是可以对任何细胞进行转染，可以转染DNA、RNA、蛋白、糖类等，也不需要特殊的试剂。

但为什么还是有很多实验者选择了脂质体介导法等方案呢？原因如下
1、电穿孔法虽然不需要特殊试剂，但需要购买昂贵的电转仪。

2、电穿孔法转染会杀死细胞，因此需要较多的细胞和外源分子。

3、电穿孔法对实验者的操作水平要求较高。过低的电场强度、过长的电脉冲时间，会裂解细胞；电压过低，过短的电脉冲时间则会降低转染效率。

因此，电穿孔法不是真正的“万能"，实验上也需要多学习、优化。

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