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qPCR中的相对定量是什么?
发布时间: 2021-10-14 点击次数: 2931次相对定量常用于测定两个不同样品中靶基因量的差异,例如使用实时RT-PCR法定量检测mRNA水平的实验。
进行相对定量实验分析两个不同样品的实验数据时,需要对数据进行归一化处理,设置其中一个样品的靶基因表达量为“1"。这个样品称为校准品,常使用表达恒定的内参基因。
通常,校准品归一化后,待测样品靶基因表达量以比“1"增加或降低n倍来表示,来显示表达量的差异。
值得注意的是,实验必须从等量原料中取得校准品和待测样品的靶基因,否则比较无意义。
与绝对定量相比,相对定量实验优点在于内参基因的使用,能规避实验操作产生的差异,而且不需要制作标准曲线。
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