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酵母和细菌蛋白质的代谢放射标记的方法
发布时间： 2021-11-08 点击次数： 1252次材料与仪器细胞
基本培养基实验步骤1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基，于合适温度中度振荡培养过夜。
2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物，继续温育至 107 细胞/ml （酵母）或对数期中期（细菌）。
3. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞，用无硫酸盐基本培养基重悬至 107 细胞/ml（酵母）或 5X108 细胞/ml（细菌）。
4. 加 H235SO4 至终浓度 20 μCi/ml。于适宜温度轻度振荡培养 1 小时（酵母）或 20 分钟（细菌）。
5. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞，吸出培养基，倒入放射性废料桶。
6. 用冰冷的基本培养基重悬细胞，如第 5 步离心收集细胞。将上清倒入放射性废料桶。用巴氏滴管吸去离心管壁残存的上清。
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