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    Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验方法

    发布时间： 2021-11-12　　点击次数： 1725次
    实验步骤


    1． 靶细胞的标记　
    用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min进行标记。
     
    2． 效-靶细胞作用　
    杀伤实验在圆底96孔培养板中进行。按E/T比例：50/1、25/1、12.5/1、6.25/1、3.13/1、1.56/1加入梯度稀释的效应细胞与标记好的靶细胞各l00μl/孔，每个比例3复孔。同时设自发释放组3复孔，*释放组3复孔。效-靶细胞作用96孔培养板在37℃ 5％ CO2培养箱孵育4h后，3000r/min离心5min，将上清移入新的孔中。
     
    3． 荧光检测　
    用荧光测量仪检测上清的荧光值(FI)，激发光为485nm，发射光为538nm。
     
    4． 结果计算
    杀伤率(％)=■×100%



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