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小鼠皮脂腺的油红染色实验步骤

发布时间： 2021-12-12　　点击次数： 2715次

材料与仪器

器材：棕色可密封瓶、研钵、漏斗、定性滤纸、冷冻切片等
试剂：
① 油红染料（称取预先研磨粉碎的 0.5 g 油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至 100 ml，棕色瓶密封（或锡箔纸包裹避光）4 ℃ 保存，为储存液，可长期保存。用时油红工作液需现配：取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完）

② 异丙醇

步骤

小鼠皮脂腺的油红染色实验的基本过程可分为如下几步：

1. 将冷冻切片从冰箱中取出，晾干。

2. 用 PBS 洗 3 次，每次 5 分钟。

3. 用 4％多聚甲醛固定 5～10 分钟。

4. 用蒸馏水洗两遍，每次 5 分钟。

5. 将切片放入 60％异丙醇洗两遍，每次 5 分钟。

6. 将切片放入油红工作液染色 15 分钟。

7. 用 60％异丙醇洗两遍，每次 5 分钟。

8. 用蒸馏水洗两遍，每次 5 分钟。

9. 苏木素复染 2 分钟。

10. 水充分漂洗 10 分钟，把周围水分抹干。

11. 封片剂封片，镜检。结果示例如图 8-11-2 所示。

注意事项

1. 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冷冻切片染色来显示。
2. 做脂肪染色的冷冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。
3. 苏木素复染时间不能过长。
4. 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。

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