实时荧光定量 PCR 的结果分析--实时荧光定量 PCR 常用名词

校正染料 (ROX)

校正加样误差或孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线，极大地改进定量的精确 度，提高重复管之间的数据重现性。

注意：不同的仪器对 ROX 的需求不同。

基线

PCR 的最初几个循环，在 此基线上荧光信号几乎没有变化。

阈值

可以相信的最小荧光值。

CT 值

扩增曲线与阈值交点的横坐标。

二、结果有效性判断

融解曲线单峰 ( 染料法 )

扩增曲线指数扩增区域，复孔间 CT 值 STD<0.2

阈值设置合理

阈值位于指数增长期：仪器会自动计算阈值，但并非所有情况下仪器计算结果都是 合理的，必要时进行手动调整。

NTC 确认无气溶胶污染或可以忽略

NTC = No Template Control (qPCR 反应，模板以水代替 )；

若 ΔCT=NTC (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可认为体系中气溶胶污染不会 影响到实验结果的准确性。

NRT 确认无基因组残留或可以忽略

NRT=No RT Control ( 逆转录反应中，除逆转录酶组分，其余组分正常添加 )；

若 ΔCT=NRT (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可认为体系中基因组残留不会 影响到实验结果的准确性。

待测 CT 值于线性范围内

扩增效率符合近似计算标准

PCR 扩增效率 (e) 介于 90%-120% 之间

安培生物致力成为推动生命科学进步值得信赖的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技术实力、先进的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业。总部设在广东，服务面向全国。安培生物集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，旨在为生命科学的发展提供较好的产品与服务。本公司建立了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、信号传导和神经科学等领域的产品供应线，在各个领域内向用户提供较高的水平和质量稳定的产品，安培生物致力于为广大的科研机构、高等院校等客户提供各种产品、技术支持与服务。可以在第一时间为用户提供比较先进的专业资讯和完备的产品和物流服务。 专业的技术力量使得我们能够为广大用户提供强大的技术支持，深厚的人脉资源使得我们在全国主要城市拥有众多的合作伙伴，安培生物非常荣幸能将世界上先进的高科技产品推荐给国内从事生物学领域科研的老师和同仁。作为专业性的产品供应商，公司出资存备了大量现货，配合优秀的销售队伍以及专业的技术支持，随时为客户提供服务