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进口胎牛血清实验时出现的黑点是怎么回事？

发布时间： 2021-12-04　　点击次数： 1507次

　　进口胎牛血清FBS是细胞培养中使用最多的生长因子，因为它含有高水平的营养，用于哺乳动物细胞培养以生产抗体、抗原、干细胞和疫苗的含血清和血清减少培养基的配制。用于免疫测定和印迹的封闭剂，所有胎牛血清都是*可追溯的，并且来自经过审核的供应商。在单独容器中处理FBS，并对其进行三次0.1μ无菌过滤，消除了任何交叉污染的可能性。
　　胎牛血清细胞培养过程中一旦发现有黑点出现，首先要肉眼观察培养基是否混浊；然后在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
　　如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么可能与以下几种情况有关：
　　1.细胞生长过老，破碎的细胞残骸；
　　2.血清质量不好，反复冻融的结果；
　　3.配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；
　　4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；
　　5.培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。
　　胎牛血清细胞培养中如何防止黑点出现：
　　1.尽可能减少血清冻融次数；
　　2.培养基无需37℃水浴；
　　3.培养基保持最佳PH值7.0-7.2；
　　4.严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗；
　　5.掌握细胞传代的理想时机，细胞切勿生长过老。

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