2×PAGE专用Taq PCR预混液(含染料)-核酸提取

2×PAGE专用Taq PCR预混液(含染料)-核酸提取

1. 产品描述：

信励致和®2×PAGE专用Taq PCR预混液(含染料)包含Taq DNA 聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×，使用时只需取适量 2×PAGE 专用 Taq PCR 预混液(含染料)，加入模板和引物，并加入ddH2O 补足体积，使PCR Mix 溶液浓度为1×即可进行反应。适用于常规PCR及较短DNA片段的PCR扩增，专用于聚丙烯酰胺电泳检测。

2. 产品特点：

（1）使用方便，仅需加⼊模板和引物即可进行PCR扩增。

（2）快速、高效，减少加样步骤，节约时间，可有效降低污染和加样错误风险。

（3）组分中包含染料，扩增产物可直接用于电泳检测

2×PAGE专用Taq PCR预混液(含染料)-核酸提取

使用说明

1. 产品组分：

2. 储运条件：

-25~-15 ℃保存12个月。干冰运输。

3. 注意事项：

（1）试剂于冰上溶解。

（2）避免试剂反复冻融。

常见问题：

1. 扩增产物没有或很少？

原因分析：模板浓度过低；实验样品DNA损伤或降解；PCR条件未优化；退火温度过高；延伸时间太短；循环次数太少；引物设计不完善；引物浓度过低；Mg2+浓度未优化；模板质量太差。

解决方案：建议DNA样品不要反复冻融，以免造成DNA的损失；优化PCR条件，对于基因片段较长的片段适当增加延伸时间，增加循环数。

2. 出现非特异性扩增？

原因分析：引起该现象的主要原因有引物浓度未优化或者引物降解；退火温度过低；引物特异性低；扩增循环数过多。

解决方案：建议将引物置于4℃或者-20℃保存；适当提高退火温度；设计特异性高的引物；扩增循环数不宜超过35。

3. 阴性对照出现空白条带？

原因分析：阴性对照出现条带一般有三个较为常见的原因，分别是引物特异性较低、PCR体系存在污染、电泳时上样量过多导致阴性对照的胶孔飘进去了样品。

解决方案：重新设计高特异性引物，并BLAST检测引物特异性；重新配置PCR反应体系；上样时避免过多，手不要抖。

4. 电泳胶图出现拖尾弥散？

原因分析：配置PCR体系时DNA聚合酶加入量过多，酶的本质是蛋白质，酶量较多会产生拖尾现象；PCR产物降解。

解决方案：建议根据反应体系的大小及产品说明书加入适量的酶；建议在获得PCR后的产物即可进行电泳，置于-20℃长期储存，尽量不要在常温放置。